Artemisia Artemisinin, Extraktion, Malaria INHALT IN ARTEMISIA ANNUA L EXTRAKTE, DIE AUF VERSCHIEDENEN VERFAHREN ERHALTEN SIND

INHALT VON ARTEMIZININ IN ARTEMISIA ANNU L-EXTRAKTE, DIE VON VERSCHIEDENEN METHODEN ERHALTEN SIND Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Padnaeed Buryat State Universität, st. Smolin, 24a, Ulan-Ude (Russland) Tomsk State University, 36, Lenina Ave., Tomsk (Russland) Baikal-Institut für Naturschutz, Sibirische Abteilung der Russischen Akademie der Wissenschaften, Ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Russland)

Es werden Fragen zur Isolierung von Artemisinin aus Artemisia annua L. und zur quantitativen Bestimmung mit der HPLC-MS-Methode behandelt. Artemisinin wurde durch verschiedene Extraktionsmethoden isoliert: Mazeration, Ultraschall und subkritische CO2-Extraktion. Die Komponentenzusammensetzung von CO2- und Hexano-Extrakten wurde mittels GC-MS untersucht.

Einleitung

Artemisinin (1) ist ein Peroxid-Sesquiterpen [1], ein hochwirksames Malariamittel und ein Vorläufer wirksamerer Verbindungen wie Artemether, Artesunat und einigen anderen. Die Bedeutung von Artemisinin und seiner Derivate beruht auf der sehr schnellen Wirkung einer Verbindung dieses Typs gegen ihren Hauptpathogen Plazmodium falciparum, der ebenfalls eine Erkrankung des Gehirns verursacht. Die chemische und biochemische Synthese von Artemisinin hat sich als sehr teuer erwiesen und ist daher derzeit nicht als Hauptquelle der Artemisinin-Produktion geeignet [2].

Malaria wird durch einen Mikroorganismus verursacht - Plasmodium Malaria. Es gibt vier Arten von Plasmodium, die im menschlichen Körper parasitisch sind: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae und P. falciparum. In der Mitte des 20. Jahrhunderts konnte dank des weit verbreiteten Einsatzes von Chinin und seiner Derivate die Zahl der Malaria-Patienten deutlich reduziert werden. Allerdings seit den 60er Jahren. Malaria des letzten Jahrhunderts erinnerte wieder an sich. Dies war darauf zurückzuführen, dass in Thailand und Südamerika Malaria-Plasmodium (P. falciparum), resistent gegen Chinin, Chloroquin, Mefloquin und andere auf Chinolin basierende Arzneimittel, in anderen Regionen auftrat und sich ausbreitete [3, 4]. Das Problem der Suche nach neuen wirksamen Antimalariamitteln, unter denen Artemisinin vorgeschlagen wurde, ist aktuell geworden. Diese einzigartige Verbindung wurde in China entdeckt (der chinesische Name ist Qinghaosu). Die Arbeiten wurden 1967 begonnen und hießen „Programm 523“ [5]. Es ist aus dem Wermut der jährlichen Atemisia annua L. isoliert, die auf dem Gebiet der ehemaligen UdSSR verteilt ist und Gebiete von Altai, Transbaikalia, Amur, Kasachstan, Kirgisistan, Usbekistan und Turkmenistan umfasst. Wermut ist in China und anderen Ländern weit verbreitet [6]. Die Gesamtmenge an Artemisinin, die aus verschiedenen Teilen von A. annua isoliert wurde, beträgt etwa 0,01 und 1,4% der Trockenblattmasse [2].

Artemisia annua L. ist der wichtigste Rohstoff für die Herstellung von Artemisinin. Die Weltgesundheitsorganisation (WHO) empfahl 2001 die Anwendung von Artemisinin in der First-Line-Therapie zur Malariakontrolle, was zu einem Anstieg der Fläche unter dem einjährigen Wermut führte. Wermut wird hauptsächlich in Ostasien jährlich angebaut, hauptsächlich in China und Vietnam (70% der Anbaufläche des Weltbestands) und vor kurzem in die Kultur im östlichen und südlichen Afrika eingeführt (20% der Anbaufläche der Welt), was ein Viertel der weltweiten Gesundheitsbedürfnisse ausmacht [7].
A. annua wird neben Artemisinin für sein ätherisches Öl geschätzt, das ein charakteristisches süßes Grasaroma besitzt und in Parfümerien und Kosmetikprodukten verwendet wird. Darüber hinaus hat das Öl antibakterielle Eigenschaften und kann zur Behandlung von Hautkrankheiten eingesetzt werden. Neben den Sesquiterpenlactonen, die den hauptsächlichen therapeutischen Wert haben, enthalten die ätherischen Öle dieser Pflanze eine signifikante Menge an wertvollen Bestandteilen, wie z. B. 1,8-Cyneol, Artemisia-Alkohol und Keton, Borneol und andere. Die Fettsäurezusammensetzung von einjährigem Wermut wurde kürzlich untersucht analysierten auch die physiologische Wirkung lipophiler Extrakte auf der Haut [2].
In Verbindung mit der in Artemisia annua enthaltenen reichen und vielfältigen Zusammensetzung biologisch aktiver Substanzen ist die Suche nach neuen Wachstumsbereichen von jährlichem Wermut von großem Interesse. In der Republik Burjatien wachsen 46 Arten von Polynum [8], einschließlich Artemisia annua L. Der Gehalt an Artemisinin in Polen, ein Jahr alt, der in Burjatien wächst, wurde bisher nicht untersucht. Ziel dieser Arbeit war daher die quantitative Bestimmung von Artemisinin in Extrakten, die durch verschiedene Extraktionsmethoden erhalten wurden.

Experimenteller Teil

Das Rohmaterial für die Studie wurde oberirdischer Teil des jährlich in der ersten Dekade des August 2010 gesammelten polnischen Jahresartemisia annua L. in der Blütephase ausgewählt.
Die Isolierung von Artemisinin und anderen biologisch aktiven Substanzen (ätherisches Öl) wurde mit verschiedenen Extraktionsmethoden durchgeführt: Mazeration, Ultraschall-Extraktion und subkritische CO2-Extraktion. Die Extraktion wurde an Laboranlagen durchgeführt. Als Extraktionsmittel wurden Hexan, Ethylacetat, Ethanol und CO2 verwendet. Die Daten und Extraktionsparameter sind in Tabelle 1 gezeigt. Extrakte aus dem Niederschlag wurden durch Zentrifugation in einer OP-8UHL4.2-Zentrifuge bei 5000 U / min abgetrennt und dann durch ein Probenfiltrationssystem filtriert.
Die Artemisinin-Quantifizierung wurde mittels HPLC-MS unter Verwendung eines Hochleistungsflüssigkeitschromatographen von Finnigan Surveyor bestimmt, der mit einem Autosampler Plus Autosampler Plus und einer LC Pump Plus-Pumpe mit einem Finnigan-Detektor LCn Advantage MAX (Ionenfalle) ausgestattet ist. Ionisationsmethode - Elektrospray. Säule "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, gefüllt mit Silicagel-Sorbens mit C18-gepfropften Phasen (Teilchengröße 5 um) (hergestellt von Thermo electronic Corporation, USA). Die Elution wurde im isokratischen Modus durchgeführt (50% (A): 50% (B)). Die Zusammensetzung des Ausgangspuffers (A) war eine wässrige Lösung von Ameisensäure (pH = 3) + 2 ml einer gesättigten Lösung von Ammoniumacetat, Elutionspuffer (B) -. 100% Acetonitril. Der Volumenstrom des Eluenten beträgt 0,5 ml / min, das Volumen der injizierten Probe (Autosampler) beträgt 25 µl. Die Ionenregistrierung wurde im Überwachungsmodus von positiv geladenen Ionen (Selected Ion Monitoring, SIM) mit einer Molekularmasse von 300 (aufgrund der Zugabe von Ammoniumion NH4 zu dem Artemisinin-Molekül) mit einer Fensterbreite (299-301) m / z durchgeführt. Die quantitative Bestimmung wurde unter Verwendung der internen Standardmethode unter Verwendung der State-Standard-Probe von Sigma durchgeführt.

Extraktionsmethoden und Parameter

P / p Extraktionsmethode Extraktionsmittel Extraktionszeit / Extraktionsparameter Artemisiningehalt in%, ausgedrückt in a.s.s.
1 Mazeration von Ethanol 24 h / Rohstoffe: Lösungsmittelverhältnis (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Mazeration Ethanol 48 h / Rohstoffe: Lösungsmittelverhältnis (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Mazeration von Hexan 24 h / Verhältnis von Probe: Lösungsmittel (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Ultraschall-Extraktions-Ethanol 15 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Ultraschallextraktion Ethylacetat 15 min / Rohstoffe: Lösungsmittelverhältnis (1: 5), Schallfrequenz 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 CO2-Extraktion so2 24 h / Flussrate 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Zusätzlich wurden die flüchtigen Komponenten von CO2- und Hexan-Extrakten durch Chromatographie-Massenspektrometrie an einem Agilent Packard HP 6890 Gaschromatographen mit einem MSD 5973N Quadrupol-Detektor untersucht. Wir verwendeten eine 30 Meter lange Quarzsäule TR-5 ms mit einem Innendurchmesser von d = 0,25 mm und einer Filmdicke von 0,25 µm. Die chromatographische Trennung wurde wie in [9] beschrieben durchgeführt. Qualitativ wurden die Komponenten der Extrakte durch Vergleich der vollständigen Massenspektren mit den Daten der Bibliothek der Chromatographiemassenspektrometriedaten flüchtiger Substanzen pflanzlichen Ursprungs AV bestimmt Tkachev, Bibliotheken NIST 08 und Wiley 275. Die Ergebnisse der Analyse sind in Tabelle 2 dargestellt.

Die Hauptkomponenten von CO2- und Hexanextrakten
Relative Peakfläche Verbindungen Relative Peakfläche
Verbindungen von CO2-Extrakt-Hexanextrakt
CO2-Extrakt Hexan-Extrakt
Monoterpenoide langkettige Kohlenwasserstoffe
Tricycylene 140181 - Tricosane 103969 52288
a-Pinen 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosan 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-Heptacosan 279800 132358
3-Caren

Cyclische Kohlenwasserstoffe
Limonen
Pentacyclo 576196 -
R-Phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0.
1,8-Cineol 133599 - (7,11)] Tetradecan
Artemisia-Keton 1413437 - 1,8-Dimethylphenanthren 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornylacetat

Diterpenoide
Sesquiterpenoide
3,5-Bis (ethylamino) benzoesäuremethylester 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Karyofillenoxid
Germacren D 214913 -
R-Selinen 3053333 328535
a-Cadinol 149485 -

Diskussion der Ergebnisse

Wie aus den in Tabelle 1 dargestellten Daten ersichtlich ist, betrug die niedrigste Ausbeute an Artemisinin (0,022%) bei der Ultraschallextraktion mit Ethylacetat. Der Gehalt an Artemisinin in Extrakten, die durch Ultraschallextraktion und Mazeration unter Verwendung verschiedener Lösungsmittel (Hexan, Ethylalkohol) isoliert wurden, unterscheidet sich nicht wesentlich von 0,038-0,040% in Bezug auf A. p. Wenn 24 - und 48 - Stunden lang jährlich Ethylalkohol - Wermut gezüchtet wird, beträgt der Gehalt an Artemisinin in den erhaltenen Extrakten etwa 0,040 bzw. 0,038%. Die höchste Ausbeute an Artemisinin (0,054%) wurde bei der vorkritischen CO2-Extraktion erzielt. Zum Vergleich präsentieren wir einige Daten über den Inhalt von Artemisinin in einem einjährigen Wermut, der in verschiedenen Gebieten wächst. Artemisia annua L., das in verschiedenen Teilen Chinas wächst, enthält 0,01 bis 0,22% Artemisinin. Einige Hybriden aus jährlich in China und Vietnam gezüchteten Wermut enthalten zwischen 1,0 und 1,5% Artemisinin [10]. Der Gehalt an Artemisinin in A. annua, der auf dem Gebiet der ehemaligen UdSSR wächst, ist wie folgt (Werte sind luftgetrocknete Rohstoffe): georgische SSR (0,005%), kirgisische SSR (0,025%), moldauische SSR (0,01-0,02%) Region Krasnodar (0,04%), ukrainische SSR (0,005-0,05%), Turkmenistan (0,05% in Bezug auf Wechselkurse), Kasachstan (0,01-0,05% in Bezug auf A. S. S.) [11].
Bei der Untersuchung der Zusammensetzung der Extrakte aus jährlichem Wermutholz, die durch CO 2 -Extraktion und Mazeration erhalten wurden, zeigten sich bei Verwendung von Hexan als Extraktionsmittel bei der Chromatographie-Massenspektrometrie signifikante Unterschiede in der Zusammensetzung dieser Extrakte. Monoterpenoide, Sesquiterpenoide, langkettige Kohlenwasserstoffe, cyclische Kohlenwasserstoffe und Diterpenoide werden mit der Methode der Massenspektrometrie nachgewiesen.
Monoterpenoide kommen nur im CO2-Extrakt vor. Die Hauptkomponenten des CO2-Extrakts sind a-Pinen, 3-Caren, Artemisia-Keton (3-Selenen, Tricozen-1, 1,8-Dimethylphenanthren und Fluoren).

Im Hexan-Extrakt aus Wermut wurden durch jährliche Gaschromatographie-Massenspektrometrie hauptsächlich langkettige Kohlenwasserstoffe und cyclische Kohlenwasserstoffe identifiziert, 3-Selen wurde aus Sesquiterpenoiden nachgewiesen.
Neben dem primärmedizinischen Artemisinin enthält das ätherische Öl eine Vielzahl biologischer Komponenten wie Artemisia Keton, 1,8-Cyneol, Borneol usw.

Schlussfolgerungen

1. Der Gehalt an Artemisinin in verschiedenen auf dem Territorium der Republik Burjatien wachsenden Extrakten von A. annua (oberer Teil der Blüte) wurde durch HPLC-MS bestimmt.
2. Der maximale Artemisiningehalt befindet sich im CO2-Extrakt (0,054% in a.s.c.).
3. Mit Hilfe der Chromatographiemassenspektrometrie wurde die Zusammensetzung des durch verschiedene Extraktionsverfahren extrahierten ätherischen Öls untersucht.

Artemisia annua L.
Taxon Beschreibung

Russische Namen

Systematik

Bilder

Pflanzen auf der Karte

Botanische Beschreibung

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. in Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; Ldb. Fl. Ross. II, 592; Boiss Fl. oder. III, 371; Maxim in Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Haken Fl. Br. Ind. III, 323; Com in fl. Manch. III, 659; Nakai, Fl. Koreanisch II, 30; Fedch. Liste var. Turk IV, 200; Rydb. North Am. Fl. 34, Teil 3, 259; Pampan in Nuov. Giorn Bot. Ital n.s. XXXIV, 637; Hall und Clem. Artem (1923) 102; Com und Alice. Opt. var. Fernost cr. II 1036; Krasheninn in fl. südosten Europ. Teil USSR, VI, 357; Grossg. Fl. Kavk. IV 138; Krasheninn und Flügel. Fl. Zap. Sib. XI, 2816; Pole in Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. in Tr. Petersburg bot Garten, X 87; Fedch. cit. cit. - Ic.: Amm. Stirp rar t. 193, f. 23; Gmel. Fl. sib. Registerkarte II. 25. - Exs.: ГРФ № 3152. - Einjähriges Wormwood.

Jährlich Die Pflanze ist duftend, grün, nackt oder mit verstreuten, kleinen, benachbarten Härchen, mit geraden, gerippten, bräunlichen oder violett-bräunlichen Stielen von 30 bis 100 cm Höhe. Blätter sind gepunktet-fossa-eisenhaltig, unteres Blattstiel, 3-5 cm lang. und 2-4 cm breit., oval, dreimal pinnakulär, Segmente der letzten Ordnung länglichlappig, kurzspitzig; ganz oder mit 1-2 Zähnen, 1-2 mm lang. und 0,5 mm breit; Mittel- und Stängelblätter sind doppelt gefiedert, oben sitzend, kleiner und weniger komplex, die obersten Hochblätter sind einfach oder haben eine geringe Anzahl von seitlichen Läppchen. Körbe sind kugelförmig, 2-2,5 mm breit, zahlreich, verworfen oder herabhängend, auf kurzen Beinen, auf kurzen Ästen zusammengezogen, in b. m langer, pyramidenförmiger Rispenblütenstand; die Hülle ist glatt, die äußeren Blätter sind linear länglich, grün, innenoval oder fast rund, mit einem breit umrandeten, glänzenden Rand am Rand; Behälter konvex, nackt; marginale Blüten der Pistillate, 10–20 in der Anzahl, krone fadenförmig, Punkt-glandulär, eng linear, Stigma-Lappen, stumpf, freiliegend aus einer Röhre; Scheibenblüten sind bisexuell, 12–30 in der Anzahl, eng angesetzt, röhrenförmig, nackt; Antheren eng linear, oberer Gliedmaßenlänglich, spitzwinklig, Grundlappen sehr kurz, spitz; die Säule ist kürzer als die Staubgefäße, das Stigma der Stigmatisierung ist linear, gerade, leicht abweichend, Ciliaten an der Spitze; Achter, 0,8–0,6 mm lang., länglich eiförmig, flach, am Scheitelpunkt mit kleiner gerundeter Plattform, am Rand kaum umrandet. Farbe VIII - IX.

In schäbigen Orten in der Nähe von Wohnungen, Gärten, in Gärten. - Europa. h.: ​​Oberes Dnister., Oberes Dnjepr., Volzh. Don., Wolga., Unteres. Don., Black., Bess., Krim. Kaukasus: West und Ost. Trans., Tal., Mi. Asien: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar., Horn. Turk Gesamt var.: Mi Heb., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolei, Norden. Amerika (Ausländer).

Die Art der Ansicht sind die Zeichnungen von Amman und Gmelin.

Khoz. Wert Die Ausbeute an ätherischem Öl beträgt 0,1–0,64% (nach Goryaev). Laut Joshikazu Imade (1937) befinden sich Cineol und Substanz C10H6O im Öl; Diese Substanz wurde von Ashania und Joshitomi (1917) im Detail untersucht. Isoartemisieaceton wurde zusammen mit Artemacyaketon im Öl gefunden. Dieses Keton konnte aus der bei der Herstellung des Artemacyaceton-Semicarbosons verbleibenden Mutterlauge isolieren. Seisi Takagi (1928), der die Studie des japanischen A. annua fortsetzte, fügte den 4 in Öl bekannten Komponenten 2 weitere hinzu: Cadinen und Karyophillen. Basierend auf den Forschungen von Rutovsky und Vinogradov (1929) besteht das Öl aus α-Pinen, Cyneol, Camphen, Artemisiaketon und Isoartemisieseketon, einer kleinen Menge Borneol, Essigsäure und Buttersäure, Kimunoaldehyd (vermutlich Semicarboson) und wahrscheinlich Phenol (Eugenol). Eine kleine Menge Alkaloide wurde in den unterirdischen Teilen gefunden (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Nach den Beobachtungen auf dem Feld (Yunatov, 1954) wird im grünen Staat kein Vieh gefressen. Die Anwesenheit von Alkaloiden wird von M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Zusammenfassung und Dissertation zum Thema Medizin (14.04.02) zum Thema: Pharmakognostische Studie von Artemisia annua L. und Artemisia sieversiana Willd. Flora von Burjatien

Zusammenfassung der Dissertation in der Medizin zum Thema Pharmakognostische Studie von Artemisia annua L. und Artemisia sieversiana Willd. Flora von Burjatien

Als Manuskript

Soktoeva Tuyana Erdemovna

PHARMAKOGNOSTISCHE FORSCHUNG ARTEMISIA ANNUA L. UND ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLORA VON BURYATIA

14.04.02 - pharmazeutische Chemie, Pharmakognosie

Zusammenfassung der Dissertation für den Abschluss eines Kandidaten für pharmazeutische Wissenschaften

Die Dissertationsarbeit wurde am Bundeshaushalt Bildungsinstitut für Hochschulbildung "Buryat State University" des Ministeriums für Bildung und Wissenschaft der Russischen Föderation und an der Gründung der Russischen Akademie der Wissenschaften des Baikal-Instituts für Umweltmanagement der Sibirischen Akademie der Wissenschaften durchgeführt

Betreuer: Doktor der chemischen Wissenschaften, Professor

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Offizielle Gegner: Doktor der biologischen Wissenschaften, Professor

Antsupova Tatjana Petrowna

Kandidat der Pharmazeutischen Wissenschaften Mongolov Hanhai Purbuevich

Führende Organisation: Perm State

Ministerium für Gesundheit und soziale Entwicklung der Russischen Föderation

Die Verteidigung findet am 23. Dezember 2011 um 10 Uhr auf der Sitzung des Dissertationsrats DM 003.028.02 im Institut für Allgemeine und Experimentelle Biologie der SB RAS an der Adresse 6, Sakhyanova St., Ulan-Ude, 670047 statt.

Die Dissertation ist in der zentralen wissenschaftlichen Bibliothek des Buryat Scientific Center der SB RAS verfügbar.

Die Zusammenfassung wurde am 22. November 2011 veröffentlicht.

Wissenschaftlicher Sekretär des Dissertationsrates Kandidat für Biowissenschaften

ALLGEMEINE ARBEITSBESCHREIBUNG Relevanz des Themas. Pflanzen der Gattung Artemisia (Wermut) sind vielversprechende Quellen für biologisch aktive Substanzen, wie der Estragon-Wermut Artemisia dracunculus L., der Wermut Artemisia absinthium L., der Wermut Artemisia vulgaris L. wird häufig in der Volksmedizin, der traditionellen Medizin und der Lebensmittelindustrie verwendet. Artemisia annua L., ein jährlicher Wermut, wurde in vielen Ländern erfolgreich in die Kultur eingeführt und wurde 2001 von der WHO als Hauptquelle für Artemisinin, die Erstlinientherapie bei Malaria, empfohlen. Heute stellen Länder, die Artemisinin herstellen, etwa ein Viertel des weltweiten Gesundheitsbedarfs bereit (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). Aus dem Einjährigen wurden 137 biologisch aktive Verbindungen isoliert, darunter 40 Sesquiterpene, 10 Triterpene, 7 Cumarine und 46 Flavonoide, die als Grundlage für die Arzneimittelentwicklung dienen können (Bhakuni, 2001). In den 80er Jahren des 20. Jahrhunderts versuchte eine Gruppe von Wissenschaftlern (Schroeter, 1989), den wildwachsenden Teil der einjährigen Flora der UdSSR im CISA (Moskau) zu kultivieren. Heutzutage werden an der Tomsk State University wichtige Arbeiten zur Einführung des ersten Jahres durchgeführt. In Burjatien n. Einjährig ist eine wild wachsende Art.

Neben dem jährlichen Parasiten in Burjatien ist der Wermut Sivers Artemisia sieversiana Willd. Weit verbreitet, was auch eine vielversprechende Art ist. Das Gras von Seabera enthält Flavonoide, ätherisches Öl und Cumarine (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Sivers ätherisches Öl ist als Quelle für Chamazulen, eine nicht toxische Verbindung mit entzündungshemmenden, bakteriziden, regenerativen Wirkungen von Interesse (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Bislang wurde eine detaillierte chemische Untersuchung von Sivers-Wermut und Wermut der jährlichen Flora Burjatiens nicht als vielversprechende Quelle biologisch aktiver Substanzen durchgeführt. Daher ist ihre Untersuchung eine dringende Aufgabe.

Ziel: Pharmakognostische Studie von Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd. und Wermut einjährig Artemisia annua L. als wertvolle Quelle für biologisch aktive Substanzen.

Um dieses Ziel zu erreichen, müssen folgende Aufgaben gelöst werden:

1. Ermittlung der anatomischen und diagnostischen Anzeichen des oberirdischen Teils von Sivers und des einjährigen P., um Merchandising-Indikatoren festzulegen

Rohstoffe, Bewertung der Reserven und der Erntemöglichkeiten auf S. ein Jahr und S. Siversa im Hoheitsgebiet der Republik Burjatien;

2. Um die chemische Zusammensetzung der Hauptgruppen der biologisch aktiven Substanzen dieser Pflanzen zu untersuchen und deren quantitativen Gehalt zu bestimmen, legen Sie die Lokalisierung von ätherischen Ölen und Artemisinin in einzelnen Pflanzenteilen fest, untersuchen Sie die Dynamik ihrer Anhäufung in den Entwicklungsphasen und bestimmen Sie die optimalen Sammelbedingungen.

3. Entwicklung einer Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin im oberirdischen Teil des Einjährigen;

4. Festlegung der Qualitätsindikatoren und -normen für den Gehalt an biologisch aktiven Grundstoffen; Erarbeitung einer Dokumentation der Vorschriften für medizinische Rohstoffe - das Gras von Sivers-Wermut und das Gras von jährlichem Wermut.

Wissenschaftliche Neuheit. Die wichtigsten diagnostischen Merkmale des Rasens von Sivers und P. annual wurden festgelegt, die für die Standardisierung der Rohstoffe erforderlichen numerischen Indikatoren wurden entwickelt.

Es wurde eine Studie über die chemische Zusammensetzung des Rasens von Sivers und über das Gras eines Einjährigen durchgeführt. Der Gehalt an ätherischen Ölen, Flavonoiden, Fettsäuren, Makro- und Mikroelementen wurde bestimmt. Flavonoide - Luteolin-7-glucosid, Rutin, Quercetin und Chryoeriol wurden in diesen Pflanzen mit der HPLC-MS-Methode nachgewiesen. Die Hauptfettsäuren in den untersuchten Wermutarten sind Palmitinsäure, Linolsäure, Linolensäure, 10% Octadekensäure findet sich auch in bedeutendem Wermut.

Die Bedingungen für die Extraktion von Artemisinin (Extraktionsmittelart, Extraktionsmethode, Extraktionszeit) aus dem jährlichen Kraut wurden bestimmt und es wurde festgestellt, dass die maximale Extraktion von Artemisinin durch Ultraschall- und subkritische CO2-Extraktion erreicht wird. Durch HPLC-MS wurde festgestellt, dass die größte Menge an Artemisinin im einjährigen Alter während der Blütephase in den Infloreszenzen enthalten ist.

Untersuchte die Dynamik der Ansammlung ätherischer Öle je nach Entwicklungsphase und Anlagenteil. Die größte Menge an ätherischem Chamazulenöl pp. Siversa reichert sich in den Knospenphasen und Blütenständen in Blütenständen an.

Die festgelegten Qualitätsindikatoren von BAS sind in den Regulierungsdokumenten enthalten.

Praktische Bedeutung Die Reserven und das mögliche jährliche Beschaffungsvolumen einer Siedlung von Sivers und einer einjährigen Ansiedlung auf dem Territorium der Republik Burjatien (Siedlung Sivers - 0,1 bis 73,7 Tonnen pro Jahr und eine Ansiedlung von 1 Jahr - 1,2 bis 122,3 Tonnen pro Jahr).

Es wurde ein Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin in S. Grass durch eine jährliche HPLC-MS-Methode entwickelt. Die Bedingungen für die Probenvorbereitung von Rohstoffen zur Analyse zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin sind wissenschaftlich begründet.

Die Standardisierung der Rohstoffe wurde durchgeführt, FS-Projekte wurden entwickelt - "Sivers Wormwood Herbal" und "Wormwood One Year Grass".

Der Umsetzungsgrad Die Methode zur Gewinnung von ätherischen Ölen und mikroskopische Analysedaten wurden getestet und in den Bildungsprozess der Abteilung für Pharmazie der staatlichen bundesstaatlichen Bildungseinrichtung „Buryat State University“ (Implementierungsgesetz Nr. 1 vom 6. September 2011) eingeführt. Projekte von FS auf Gras von Sivers Wermut und einjähriges Wermut werden zur Prüfung vorbereitet.

Zur Verteidigung werden herausgenommen:

• die Ergebnisse der Untersuchung der anatomischen Struktur, der Bestände und der Echtheitskriterien von Sivers und P., die in Burjatien wachsen;

• Ergebnisse einer chemischen Untersuchung biologisch aktiver Substanzen und ihrer saisonalen Akkumulationsdynamik;

• Ergebnisse von Studien zur Standardisierung des oberirdischen Teils von Sivers S. Und S. Ein Jahr.

Approbation der Arbeit. Die wichtigsten Bestimmungen der Dissertation wurden vorgestellt und diskutiert auf: einer wissenschaftlich-praktischen Konferenz mit internationaler Beteiligung „Die Entwicklung der traditionellen Medizin in Russland: Erfahrung, Forschung, Perspektiven“ (Ulan-Ude, 2010); 7. Wintersimposium für Chemometrie "Moderne Methoden der Datenanalyse" (Sankt-Petersburg, 2010); die internationale wissenschaftliche Konferenz, die dem 15-jährigen Bestehen der Buryat State University "Aktuelle Studien des Baikalasiens" gewidmet ist (Ulan-Ude, 2010); V internationale wissenschaftlich-praktische Konferenz "Prioritäten und Merkmale der Entwicklung der Baikalregion" (Ulan-Ude, 2011); X internationale wissenschaftlich-praktische Konferenz "Probleme der Botanik in Südsibirien und der Mongolei" (Barnaul, 2011); IV. Allrussische Konferenz "Neue Fortschritte in der Chemie und in der chemischen Technologie von Pflanzenmaterialien" (Barnaul, 2009); XVI. Internationale Konferenz der Studenten, Doktoranden und Nachwuchswissenschaftler "Lomonosov-2009" (Moskau, 2009); XV. Internationale ökologische Studentenkonferenz "Ökologie Russlands und angrenzender Gebiete" (Novosibirsk, 2010); II. Allrussisch-wissenschaftlich-praktische Konferenz von Studenten, Doktoranden und jungen Wissenschaftlern "Technologien und Ausrüstung der chemischen, biotechnologischen und Lebensmittelindustrie" (Biysk, 2009); Allrussisch-wissenschaftlich-praktische Konferenz "Vegetation

Die Baikalregion und angrenzende Gebiete “(Ulan-Ude, 2011); V Schulseminar für junge Wissenschaftler aus Russland “Probleme der nachhaltigen Entwicklung der Region” (Ulan-Ude, 2009); die regionale wissenschaftlich-praktische Jugendkonferenz mit internationaler Beteiligung "Umweltfreundliche und ressourcenschonende Technologien und Materialien" (Ulan-Ude, 2010).

Die Arbeit wurde im Rahmen von Forschungsprojekten durchgeführt: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Untersuchung der biogenetischen Muster der Biosynthese biologisch aktiver Verbindungen von endemischen Pflanzen in Zentralasien" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Chemische Zusammensetzung von Pflanzen als Indikator der Zustand der Ökosysteme der Baikalregion "(2008-20 Yugg,); interdisziplinäres Integrationsprojekt Nr. 93 "Entwicklung der Forschung auf dem Gebiet der medizinischen Chemie und Pharmakologie als wissenschaftliche Grundlage für die Entwicklung heimischer Arzneimittel"; ein gemeinsames Projekt mit der Akademie der Wissenschaften der Mongolei "Neue lipo- und nanosomale Formen von Medikamenten unter Verwendung natürlicher Rohstoffe"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilität junger Wissenschaftler" (2010), 11-03-90705-mob_st wissenschaftliche Arbeit (Ausbildung) von russischen Nachwuchswissenschaftlern in den führenden wissenschaftlichen Organisationen der Russischen Föderation 2011 (2011).

Veröffentlichungen. Den Ergebnissen zufolge wurden 17 wissenschaftliche Arbeiten veröffentlicht, von denen drei in von der Higher Attestation Commission des Verteidigungsministeriums der Russischen Föderation empfohlenen Zeitschriften veröffentlicht wurden.

Umfang und Aufbau der Arbeit. Die Dissertationsarbeit wird auf 172 Seiten mit maschinengeschriebenem Text präsentiert und besteht aus Einführung, Literaturrecherche (1 Kapitel), experimentellem Teil (4 Kapitel), allgemeinen Schlussfolgerungen, Referenzliste und Anwendungen. Die Arbeit wird mit 37 Tabellen und 61 Abbildungen veranschaulicht. Der bibliografische Index umfasst 139 Quellen, darunter 42 ausländische.

In der Einleitung wird die Relevanz des Themas begründet, der Zweck und die Ziele der Forschung werden formuliert, die wissenschaftliche Neuheit und die praktische Bedeutung der Arbeit werden vorgestellt.

Das erste Kapitel (Literaturübersicht) enthält Daten zur chemischen Zusammensetzung, zum Spektrum der pharmakologischen Aktivität und zur Verwendung der Gattung Artemisia L. in der traditionellen und modernen medizinischen Praxis.

Das zweite Kapitel (Materialien und Methoden) enthält Daten zu den Untersuchungsobjekten, zu den verwendeten Methoden, zu Geräten und Reagenzien sowie zu anderen methodologischen Informationen.

Das dritte und vierte Kapitel enthalten Daten zur Untersuchung der anatomischen und diagnostischen Anzeichen von Severs S und eines einjährigen Kindes. Nach Methode

Die UV-Spektrophotometrie bestimmte den Gesamtgehalt an Flavonoiden und Tanninen in den Untersuchungsobjekten. Mit Hilfe von GC-MS wurde die qualitative und quantitative Zusammensetzung von ätherischen Ölen und Fettsäuren von Wermut untersucht. Die HPLC-MS-Methode legte den qualitativen und quantitativen Gehalt von Flavonoiden fest. Die elementare Zusammensetzung von Pflanzen wurde nach der AAS-Methode bestimmt. Eine Technik zur Quantifizierung des Artemisiningehaltes wurde entwickelt und vorgeschlagen. durch HPLC-MS. Darüber hinaus untersuchten wir die chemischen Zusammensetzungen der ätherischen Öle der fünf Arten von Polynyas, die am häufigsten in Burjatien und der Mongolei vorkommen - dem Wermut Gmelin Artemisia gmelinii Web. et Stechm., Wermut, grau Artemisia glauca Pall, von Wild., Wermut, großkammig Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., Sievers Wermut Artemisia sieversiana Willd. und Artemisia annua L.

Das fünfte Kapitel enthält Daten zur Standardisierung der Kräuter von Sivers und P. des Einjährigen, die als vielversprechende Quellen für Chamazulen bzw. Artemisinin vorgeschlagen werden.

Der Hauptinhalt der Arbeit

Objekte und Methoden der Forschung. Gegenstand der Studie waren Grasproben von Sivers und jährliche Dörfer, die in verschiedenen Bezirken der Republik Burjatien (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) der Region Irkutsk (Insel Olkhon) und der Mongolei (Selenginsky Aimak) aus dem Jahr 2008 gesammelt wurden bis 2011

Eine mikroskopische Analyse wurde gemäß dem Artikel "Technik der mikroskopischen Analyse" (GF XI, Ausgabe 2) an Mikmed-Mikroskopen (Lomo, Russland) mit einem Okular 10x durchgeführt; Linsen 4x, 10x, 40x und MS-300 (TFXS), Fluorescent System Set (Micros, Österreich) mit einem Okular 10x; Objektive 4x, 10x, 40x. Die Rohstoffausbeute wurde nach der Methode der Abrechnungsstandorte bestimmt.

Die Extraktion des ätherischen Öls wurde durch Hydrodestillation durchgeführt, die Extrakte wurden durch Ultraschallextraktion, CO2-Extraktion und Mazeration erhalten.

Die Untersuchung der qualitativen und quantitativen Zusammensetzung dieser Objekte wurde mit den folgenden Verfahren durchgeführt - GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV-Spektrophotometrie und AAS. Chromatomassenspektrometrische Analyse wurde auf einem Agilent 6890-Gaschromatographen mit einem HP MSD 5973N Quadrupol-Massenspektrometer (Agilent Technologies, USA; Säulen: HP-5ms, g = 0,25 mm, Filmdicke 0,25 µm (Copolymer - 5%, Diphenyl) durchgeführt - 95% Dimethylsiloxan) und DBWax mit einem Innendurchmesser von 0,25 μm, Trägergas - Helium, g) Fluss 1–1,5 ml / min; Die HPLC-MS-Analyse wurde an Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographen von Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) und Agilent 1200 (Agilent Technologies, USA) durchgeführt.

USA) mit dem massenselektiven Detektor "LCQ Advantage MAX" ("Ionenfalle") der Marke "Finnigan" (Thermo Scientific, USA) und mit einem Tandem - Massenspektrometriedetektor ("Ionenfalle") 6330 (Agilent Technologies, USA) Ionisationselektrospray; Bedingungen: Hypersyl Gold Cl8, 5 Mikrometer, 150 × 4 mm-Säulen (Thermo Electronic Corporation, USA) und Zorbax Eclipse C18, 5 Mikrometer, 4,6 × 150 mm (Agilent Technologies, USA), Eluentflussrate 0,5 ml / min. Die TLC-Analyse wurde auf Sorbfil-PTSH-P-A-UV-Platten (Imid Ltd., Russland) durchgeführt. Die BC-Analyse wurde auf FN 6-Papier (Filtrak, Deutschland) durchgeführt. Absorptionsspektren wurden mit einem StellarNet Green Waiv-Spektrometer (StellarNet Inc., USA) aufgenommen, die AAC-Analyse wurde mit einem SOLAAR MB-Spektrophotometer (Thermo Scientific, USA) und dem Varian-Modell AA240 (Varian, Russland) durchgeführt.

Die statistische Verarbeitung der experimentellen Daten wurde durch die Methode der statistischen Variationsanalyse durchgeführt. Ein Teil der Daten wurde von CIM (Softwarepaket Sirius Version 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Norwegen) verarbeitet.

Pharmakognostische Eigenschaften des Krauts von P. Sivers und P. des Sommers. Die folgenden Indikatoren für die Qualität von medizinischen Rohstoffen. Sivers Wermutgras. Ganze Rohstoffe. Feste oder teilweise belaubte Spitzen von Blütenstielen mit einer Länge von höchstens 45 cm, die keine groben Teile des Stiels enthalten. Stamm weichhaarig, gerade, gerippt und verzweigt. Radikale und mittlere Blätter sind gestielt, dreieckig, dreifach gefiedert, längliche, flache Scheiben, 1,4 - 2,5 cm lang, 0,1 - 0,5 cm breit, Körbe halbkugelförmig, 0,4 - 0,6 cm Durchmesser, breit panischer Blütenstand. Rand Pistillate Blumen (es gibt etwa 18). Blüten bisexuell, zahlreich, mit einer trichterförmigen Krone.

Graswermut jährlich. Ganze Rohstoffe. Obere oder teilweise belaubte Spitzen von Blütenstielen mit einer Länge von höchstens 50 cm, die keine groben Teile des Stängels enthalten. Der Stiel ist kahl, gerade, gefurcht, zu Beginn der Vegetationsperiode grün und am Ende dunkelviolett. Das Blatt der unteren und mittleren Stängelblätter ist eiförmig oder oval, am Blattstiel 1,5-7,0 cm lang, elliptisch, ohne Flügel, dreimal in breite Segmente, Segmente und Segmente überexprimiert, 0,5 bis 0,8 cm lang, nicht breit mehr als 0,2 cm. Körbe mit einem Durchmesser von etwa 0,2 cm in panikuliertem Blütenstand.

Bei einer anatomischen Untersuchung des Rasens von P. Sivers und P. ein Jahr wurden eine Reihe von anatomischen und diagnostischen Merkmalen identifiziert. Die Struktur der Wermutblätter ist in Tabelle 1 dargestellt. Der Stängel von Sivers-Wermut ist grob, die länglichen Epidermiszellen.

Es gibt ätherische Öldrüsen, T-förmige Haare und abgerundete Stomazellen. Der Stamm hat eine bündelartige Struktur. In den Rippen befinden sich Bereiche des Schlanken. Kollanteralstrahlen, die in einem Kreis angeordnet sind, sind durch ein stark entwickeltes Sklerenchym gekennzeichnet. Gut markiertes Endoderm, bestehend aus großen, dünnwandigen Zellen mit runder Form, die eng nebeneinander liegen.

Merkmale der anatomischen Struktur der Blätter von S. Sivers und S. 1 Jahr __

Sivers Wermut Epidermis Wermut jährlich

obere gerade Wand

untere Wickelwand niedrig Amboss

Typ der Ustigitscheski Apparat oberen Anomozytose

untere Anomozytose, Stomata mehr als auf der Blattoberseite

Stomata ovale Form mit Linsenstomazellen

Charakteristisch für dicht behaarte Haare mit T-förmigen Haaren, die aus zwei-, vierzelligen Beinen und mehrzelligen Flagellhaaren bestehen, gibt es zwei Arten von Haaren - sternförmig und T-förmig mit mehrzelligem Bein

Terpenoid-enthaltende Strukturen sind vielzellige, große ätherische Öldrüsen. schizogene Gefäße und unspezialisierte Parenchymzellen

an der Stelle einjähriger, gerillter, fast nackter Stängel, verlängerte Epidermiszellen. Im Stiel des Einjährigen sowie im Stiel von S. Sivers, einer puchkowischen Struktur, befinden sich essentielle Öldrüsen, selten Haare und ovale Stomazellen; Bei beiden Arten von Wermut sind die Epidermiszellen an der Krone der röhrenförmigen Blüten dünnwandig, mit spitzen Enden verlängert, gekennzeichnet durch das Vorhandensein einer großen Anzahl von ätherischen Öldrüsen und das Fehlen von Haaren.

Merchandising-Indikatoren wurden für mehrere Chargen von Rohstoffen festgelegt:

Sivers Wermutgras. Luftfeuchtigkeit (nicht mehr als 7%), Gesamtasche (nicht mehr als 11%), in 10% iger Salzsäure (nicht mehr als 2%) unlösliche Asche, extraktive Substanzen (nicht weniger als 33%), Blätter braun und geschwärzt (nicht mehr als 5%) ), organische Verunreinigung (nicht mehr als 2%), mineralische Verunreinigung (nicht mehr als 0,5%).

Graswermut jährlich. Luftfeuchtigkeit nicht mehr als 7%, Gesamtasche (nicht mehr als 9%), in 10% iger Salzsäure (nicht mehr als 1%) unlösliche Asche, Extraktionsmittel (nicht weniger als 42%), braune und geschwärzte Blätter (nicht mehr als 5%), organische Verunreinigung (nicht mehr als 2%), mineralische Verunreinigung (nicht mehr als 0,5%).

Nach den Ergebnissen einer vorläufigen phytochemischen Analyse wurden ätherisches Öl, Flavonoide, Tannine, Hydroxyzimtsäuren, Cumarine, Fettsäuren und Sesquiterpenlactone im Gras von Sivers und P gefunden.

Aktien von Sivers und P. von einem Jahr. Tabelle 2 enthält Daten zu Erträgen, biologischen (BZ) und betrieblichen Reserven (EZ) von Sivers sowie zum jährlichen Wachstum in verschiedenen Regionen Burjatiens.

Vorräte an Rohstoffen von S. Sivers und S. Ein Jahr in Gebieten von Burjatien

Erntefläche (g / m2) gesamtes E-Wachstum, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env Stadt Gusinoozersk 58,0 ± 4,1 0,8 530,0 398,4

env c. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 ​​154,4 116,0

env c. Borate 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

env mit Taphar 500,0 ± 26,3 0,5 2763,0 2237,0

env c. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

Kabansky Bezirk 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Tunkinsky District 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

Pribaikalsky District 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Kurumkansky Bezirk 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

env c. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

env Bevölkerung 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

env c. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

Kabansky District 400.0 ± 27.1 30.0 136260.0 103740.0

Die Produktivität des oberirdischen Teils des Wermuts von Sivers und des Jahresgehaltes der untersuchten Dickichte variiert zwischen 33,8 ± 2,4 und 500,0 ± 32,5 g / m² bzw. zwischen 39 ± 2,1 und 500 ± 46,2 g / m². Die biologischen und betrieblichen Reserven der oberirdischen Teile der untersuchten Pflanzen betragen 154,4-97320,0 kg und 116,0-73680,0 kg (Sivers-Wermut), 1.497,6177720,0 kg und 1238,4-122280,0 kg (Jahres-Wermut).

Chemische Studie der Kräuter von P. Sivers und P. der jährlichen Flavonoide. Der quantitative Gesamtgehalt an Flavonoiden wurde durch die allgemein anerkannte Methode der spektrophotometrischen Bestimmung von Sivers und P. annuals im Gras in Bezug auf Luteolin-7-glucosid in verschiedenen Phasen der Pflanzenentwicklung (Vegetation, Knospung, Blüte, Fruchtbildung) bestimmt. Der höchste Gehalt an Flavonoiden wurde in den Proben von Severs und einjährigen Proben, die in der Sprossphase gesammelt wurden, mit 0,68 und 0,66% ermittelt, der niedrigste in den in der Fruchtphase gesammelten Rohstoffen - 0,31% und 0,38% (Tabelle 3).

Der quantitative Gehalt der Flavonoide in Bezug auf Luteolin-7-glucosid im Gras von P. Sivers und im Gras von P. ein Jahr je nach Vegetationsphase

Pflanzenentwicklungsphase, die Menge an Flavonoiden, ausgedrückt als Luteolin-7-glucosid (%)

Wermut Sivers Wermut jährlich

Vegetation 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

Knospung 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

Blütezeit 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

Fruchtbildung 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

Die folgenden Flavonoide wurden mit der HPLC-MS-Methode nachgewiesen: Rutin, Luteolin-7-glucosid, Chryo-Eriol, Quercetin im Gras von Sivers und im Gras eines einjährigen Mannes (Abb. 1).

Fig.1. Chromatogramm von Flavonoiden und P. Sivers, P. ein Jahr.

Die externe Standardmethode wurde verwendet, um den quantitativen Gehalt an Rutin, Chryseriol, Quercetin im Gras von Sivers und im Gras des Einjährigen zu bestimmen (Tabelle 4).

In beiden Arten von Wermut ist Luteolin-7-glucosid 0,04–0,08% (Sivers) und 0,88–1,77% (n. Ein Jahr) in der größten Menge enthalten, Quercetin 0,001% (Sivers) und 0,0070,009% (n. 1) ein Jahr).

Der quantitative Gehalt an Flavonoiden (HPLC-MS)

Flavonoidkollektion von Sivers Wormwood (%)

Rutinquercetin Luteolin-7-glucosid

Bezirk Ivolginsky, okr. c. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Bezirk Ivolginsky, okr. S. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

Die FLY ist ein Jahr alt und der Ivolginsky District, OKR. S. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Kabansky Bezirk, OKR. c. Schabe 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Fettsäuren Wermutproben enthalten 8 bis 13 Fettsäuren. Für beide Arten sind Palmitinsäure (16: 0), Linolsäure (18: 2p6), Linolensäure (18: ZpZ) in der Menge von 56,87-82,67% (der Gesamtfettsäuren) in Severs, 58,36-67,19% in n. ein Jahr (von Gesamtfettsäuren). Zusätzlich zu diesen Säuren enthält eine signifikante Menge 10-Octadekensäure (18: 1p8) von 3,64% bis 11,65%. Auch in allen Proben wurden 10-Methyl-Undecansäure (¡° 12: 0) und 12-Methyltetradecansäure (und 15: 0) nachgewiesen, deren Gehalt 1% nicht überschreitet. Chromatogramme sind in Abbildung 2 dargestellt.

Abb. 2. Chromatogramme von Fettsäuren (a) S. Sivers und (b) S. Ein Jahr (I - (16: 0), 2 - (18: 2 · 6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1 · 8) ).

Elementare Zusammensetzung. Im Gras von P. Sivers, das in verschiedenen Regionen Burjatiens wächst, beträgt der Calciumgehalt 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, Magnesium - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Der höchste Gehalt an Kalzium und Magnesium wird in Proben im Bezirk Kurumkansky festgestellt, der niedrigste Gehalt an Magnesium in den Rohstoffen des Bezirks Tunkinsky und Kalzium in Pflanzen, die im Bezirk Selenginsky gesammelt wurden. Eisen kommt hauptsächlich in Pflanzen aus der Region Kurumkansky vor

(141,25 ± 12,13 mg / kg), weniger - aus dem Bezirk Selenginsky (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Der Zinkgehalt variiert zwischen 23,73 ± 1,56 und 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Sivers und von 55,32 ± 0,83 bis 66,50 + 0,89 mg / kg ist ein Jahr alt, was für das normale Funktionieren biochemischer Prozesse akzeptabel ist. Der Kupfergehalt beträgt 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - ein Jahr alt (die erforderliche Menge liegt zwischen 5 und 30 mg / kg). Das Nickel im Gras von Seabera enthält 0,40 ± 0,01 - 2,06 ± 0,03 mg / kg, was einer Pflanzenbedarfsrate von 0,1 bis 5 mg / kg entspricht. Der Kobaltgehalt in der Pflanze sollte 1 mg / kg Blei - 10 mg / kg Cadmium - 0,2 mg / kg Chrom - 1,0 mg / kg nicht überschreiten (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). In Sivers S. Der Kobaltgehalt beträgt weniger als 0,3 mg / kg, Blei 3,19 ± 0,11 mg / kg, in S. Einjähriger - 0,59 ± 0,02 mg / kg, Cadmium - 0,18 ± 0,02 mg / kg, Chrom - 0,76 ± 0,02 mg / kg in allen proben. Der Gehalt an Makro- und Mikronährstoffen liegt daher in Konzentrationen vor, die für den Fluss der Vitalfunktionen von Pflanzen normal und ausreichend sind.

Sivers Wermutkraut ätherisches Öl. Das ätherische Öl aus Pflanzen wurde durch die Pharmakopoex-Methode Nr. 2 isoliert. In verschiedenen Proben von S. Sivers liegt der Gehalt an ätherischem Öl zwischen 0,1 und 1,9%. In den ätherischen Ölen von Sivers, die in verschiedenen Teilen Burjatiens wachsen, wurden mehr als 80 Verbindungen identifiziert.

Wir haben die Zusammensetzung ätherischer Öle untersucht, die aus dem Gras von Sivers Wermut isoliert wurden, das in verschiedenen Teilen Burjatiens wächst

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4,9))

Tunkinsky (5), Zakamensky-Bezirke (8), Region Irkutsk (Insel Olkhon) (6) und die Mongolei (7). Die höchste Ausbeute an ätherischem Öl ist im Wermut von Sivers in den Regionen Tunkinsky und Kurumkansky (0,4%) zu finden. Die Mindestmenge an Öl wurde aus Pflanzen isoliert, die auf dem Territorium von Zakamensky, Pribaikalsky und der Mongolei (0,1%) gesammelt wurden (Abb. 3).

Die Dynamik der Akkumulation ätherischer Öle wurde in Abhängigkeit von der Pflanzenentwicklung untersucht (Abb. 4). Die Ergebnisse zeigten, dass sich das Öl in der Blütephase (0,6%) in der größten Menge ansammelt

Abb. 3. Die Ausbeute an ätherischen Ölen vom Standort des Wachstums.

Knospen- und Fruchtphasen sammeln sich in derselben Menge ätherisches Öl (etwa 0,3%).

1- 1,8-Daneol-I-terpineal-4 3-p-pharmacne '1-sishna-4,11-dnen

Abb. 5. Chromatogramm ätherisches Öl S. Sivers.

Abb. 4. Die Ausbeute an ätherischem Öl p.

Sivers in verschiedenen Phasen der Pflanzenentwicklung (In-Vegetationsperiode, b - Knospung, c - Blüte,

Alle Bestandteile des ätherischen Öls können in zwei Gruppen eingeteilt werden - konstant, dh in allen Phasen der Pflanzenentwicklung im Öl anzutreffen und sporadisch (geringfügig). In allen Proben des ätherischen Öls von Sivers wurden 1,8-Cineol (2,34–22,57%), Terpineol-4 (0,964,70%), Germacren E (8,66–12,36%) und P-Farnezen, unabhängig von der Pflanzenanbaufläche, bestimmt (0,64-5,17%), Selina-4,11-dien (0,97-4,66%), Neril-2-methylbutanoat (4,80-8,79%) und Chamazulen (0,60-25,36%) (Fig. 5).

Ätherische Öle, isoliert aus Pflanzen, die in den Steppenregionen wachsen, im Bezirk Pribaikalsky (25,36%), enthalten die kleinste Menge an Hamazulen und die kleinste Menge - im Bezirk Zakamensky (0,60%).

In der Zusammensetzung des ätherischen Öls, das aus Pflanzen in verschiedenen Entwicklungsstadien - Vegetation, Knospung, Blüte und Fruchtbildung - isoliert wurde, wurden 54 Verbindungen identifiziert. Die konstanten Komponenten sind 1,8-Cyneol, Linalool, Terpineol-4, α-Terpineol, p-Farnezen, Selina-4,11-dien, Chamazulen.

Der Chamazulen-Gehalt variiert in der Vegetationsphase von 0,20 bis 24,69%, in der Knospenphase von 21,34 bis 61,91%, in der Blütephase von 1,53 bis 34,42% und in der Fruchtphase von 10,87 bis 20,64%. Die Menge der sporadisch erscheinenden Komponenten ist signifikant (bis zu 40 Verbindungen) und gleichzeitig ihr niedriger quantitativer Gehalt. Daher ist es schwierig, die Abhängigkeit ihrer Zusammensetzung von der Phase der Pflanzenentwicklung zu bestimmen.

Zur Beurteilung des Einflusses der Entwicklungsphase auf die Ölkomponenten wurde CIM verwendet (Abb. 6).

Abb. 6. GK-Modell abhängig von der Zusammensetzung

ätherisches Öl aus der Entwicklungsphase von Sivers (I-Vegetation, 2-Knospung, 3-Blüte, 4-Fruchtbildung)

Dies ist eine der Analysen

multidimensionale Daten, die es erlauben, versteckte Variablen in großen Datenfeldern zuzuordnen und Beziehungen zu analysieren

im untersuchten System vorhanden. Das Ziel der Hauptkomponentenmethode besteht darin, die ursprüngliche Beschreibung der Stichproben mithilfe von p-Variablen für eine neue Form zu ersetzen, die im Raum der Hauptkomponenten dargestellt wird (Esbenson, 2010).

Auf dem GK-Modell ist es möglich, getrennte voneinander getrennte Bereiche zu unterscheiden, die unterschiedlichen Entwicklungsphasen von Sivers-Wermut entsprechen, was darauf hindeutet, dass sich die Zusammensetzung des Öls in verschiedenen Entwicklungsphasen im Gehalt an Nebenverbindungen unterscheidet.

Daher stimmt die qualitative Zusammensetzung des ätherischen Öls in verschiedenen Phasen der Sivers-Entwicklung konstant überein und unterscheidet sich in geringfügigen Verbindungen.

Eine Studie zu den Phasen der Pflanzenentwicklung zeigte, dass die größte Menge an Chamazulen im ätherischen Öl von Seversa in der Spross- und Blühphase konzentriert ist, während die Ölansammlung in der Blütephase größer ist als in der Sprossphase. Daher haben wir in diesen Phasen die Besonderheiten der Anreicherung von ätherischen Ölen in verschiedenen Teilen der Pflanze untersucht (Abb. 7).

Über die Knospenphase In der Blütephase

Abb. 7. Die Ausbeute an ätherischem Öl in verschiedenen Teilen von Sivers.

Extrahierbares ätherisches Öl aus verschiedenen Pflanzenteilen in der Blütephase zeigte, dass die Blütenstände (Körbe) durch den höchsten Ertrag gekennzeichnet sind, die Blätter kleiner sind und die Stängel minimal sind. In Phase

Knospen im Gras von P. Sivers ist vor allem in den Knospen enthaltenes Öl, etwas weniger in den Blättern und die minimale Ölmenge in den Stielen.

Eine Analyse des ätherischen Öls aus verschiedenen Teilen der Pflanze ergab, dass die Komponentenzusammensetzung des aus den Blütenständen und Grashalmen von Sivers gewonnenen Öls mit mehr als 70 Komponenten vielfältig ist, dann mehr als 40 Komponenten aus den Blättern und weniger als alle Verbindungen in dem aus den Stämmen extrahierten Öl etwa 20 Komponenten. Die konstanten Bestandteile der ätherischen Ölproben sind unabhängig von ihrem Standort 1,8-Cyneol, Linalool, Terpineol-4, Germacren 13, α-Terpineol, α-Bisabolol und Chamazulen (Tabelle 5).

Konstante Bestandteile von Sivers Wormwood Essential Oil

Komponentengehalt der Komponenten in% des Gesamtöls

Blütephase Knospe

Blütenstände Blätter Stiele Knospen Blätter Stiele

1,8-Cineol 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

Linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

Terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-Terpineol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7.20 7.81 1.96 11.18 7.81 10.57

a-Bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulen 6.23 23.02 37.11 7.81 21.17 3.51

Die Analyse zeigte, dass die qualitative Zusammensetzung des ätherischen Öls in verschiedenen Wachstumsbereichen, in verschiedenen Entwicklungsstadien und in verschiedenen Teilen von Seversa konstant ist und sich in sporadisch auftretenden Verbindungen unterscheidet.

Ätherisches Öl des Wermutkrauts. Wie im ersten Fall wurde die Auswahl des ätherischen Öls nach der Pharmakopoex-Methode Nr. 2 durchgeführt. Die chemische Zusammensetzung der jährlichen ätherischen Öle wird durch 40 Komponenten dargestellt. Die konstanten Komponenten sind Artemisia Keton (10,24–14,62%), Caryophyllen (9,93–10,71%), Germacren B (3,53–7,82%), p-Selenen (21,75–29,46%), Karyofillenoxid (4,44– 14,31%) (Abb. 8).

In verschiedenen Stadien der Pflanzenentwicklung werden 0,5 bis 0,7% ätherisches Öl aus dem Wermutkraut gewonnen. Die höchste Ausbeute an ätherischem Öl in der Blütephase (0,7%) (Abb. 9).

In allen Stadien der Pflanzenentwicklung sind im ätherischen Öl Artemisiaketon, Karyofillen (3-Selenium, Karyophylnoxid) enthalten.Der quantitative Gehalt der Hauptkomponenten ändert sich in verschiedenen Phasen der Pflanzenentwicklung. und Karyofillenoxid - in der Blütephase.

3. Chromatogramm des ätherischen Öls pro Jahr.

Abb. 9. Die Ausbeute an ätherischen Ölen pro Jahr in verschiedenen Phasen der Pflanzenentwicklung (In-Vegetation, B-Knospe, c-Blüte, p-Fruchtbildung).

Die ätherischen Öldrüsen sind in der Pflanze ungleichmäßig verteilt, daher können ätherische Öle aus verschiedenen Anlageteilen unterschieden werden, die sich sowohl quantitativ als auch qualitativ unterscheiden.

Die Besonderheiten der Ansammlung ätherischer Öle in der Blütephase in verschiedenen Teilen des jährlichen Wermuts (Abb. 10) wurden bestimmt.

In ätherischen Ölen aus verschiedenen Teilen der Pflanze wurden mehr als 60 Verbindungen gefunden. Konstant

Komponenten für Öle aus Blütenständen, Blättern, Stielen sind Artemisia Alkohol, p-Karyophillen, Oxid

Der Hauptbestandteil des jährlichen ätherischen Öls ist Artemisia Keton - es wird nicht im Öl der Stiele gefunden, obwohl es zur Hälfte im Öl von Infloreszenzen (49,14%) und fast einem Drittel der Blätter (29,76%) liegt.

Die Analyse der ätherischen Öle zeigte, dass die qualitative Zusammensetzung des ätherischen Öls in verschiedenen Wachstumsbereichen, in verschiedenen Entwicklungsstadien und in verschiedenen Teilen des n. Einjährigen Grases sowie n. Sievers-Grases in konstanten und in sporadisch auftretenden Bestandteilen gleich ist.

Entwicklung einer Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin in Wermut durch eine jährliche HPLC-MS-Methode

Auswahl der Bedingungen für die quantitative Extraktion von Artemisinin aus dem jährlichen Wermut. Entwicklung einer quantitativen Methodik

1 2 von Fig. 10. Die Ausbeute an ätherischem Öl in verschiedenen Teilen des Jahres (1-Blütenstand, 2 Blätter, 3 Stämme).

Artemisinin-Bestimmungen im Gras von P. von einjährigen Extraktionsbedingungen wurden ausgewählt, unter denen die Extraktion von Artemisinin seinen maximalen Wert erreicht. Die durch die Verfahren der Mazeration, Ultraschall-Extraktion und subkritischen CO2-Extraktion erhaltenen Extrakte wurden analysiert. Als Extraktionsmittel wurden verschiedene Lösungsmittel verwendet (Tabelle 6). Der Gehalt an Artemisinin in Extrakten, die durch Ultraschallextraktion und Mazeration unter Verwendung verschiedener Lösungsmittel abgetrennt werden, unterscheidet sich nicht signifikant (0,038-0,040%). Die größte Menge an Artemisinin (0,054%) ist in dem Extrakt enthalten, der bei der subkritischen CO2-Extraktion erhalten wird.

Methoden und Parameter zum Extrahieren von Extrakten aus dem einjährigen Wermutgras durch verschiedene Extraktionsmethoden ______

Extraktionsmethode Extraktionszeit Extraktionszeit / Extraktionsparameter Artemisiningehalt in%, ausgedrückt in a.s.s.

Ethanol 24 h / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), T = 25 ° C 0,040 ± 0,002

Mazeration Ethanol 48 h / das Verhältnis der Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), T = 25 ° C 0,038 ± 0,002

Hexan 24 h / Probe: Lösungsmittelverhältnis (1: 5), T = 25 ° C 0,039 ± 0,002

Essigsäureethylester 15 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ethanol 5 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ultraschallextraktion von Ethanol 10 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

Ethanol 15 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 kHz, T = 25 ° C, C 0,039 ± 0,002

Ethanol 20 min / Verhältnis Rohstoffe: Lösungsmittel (1: 5), Schallfrequenz 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

CO2-Extraktion von CO2 24 h.1 Fließgeschwindigkeit 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Von allen vorgeschlagenen Extraktionsverfahren ist die Ultraschallextraktion optimal (Ethanolextraktionsmittel), da dieses Verfahren schnell ist (Extraktionszeit 15 Minuten) und instrumentell verfügbar ist.

Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin.

Die Entwicklung einer Technik zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin in der jährlichen Krautart erfolgte mittels HPLC-MS. Wir haben Agilent 1200 HPLC mit einem MC - Detektor ("Ionenfalle") 6330, einem Ionisationsverfahren - Elektrospray, verwendet. Die Elution wurde auf isokratische Weise durchgeführt (50% (A): 50% (B)), die Zusammensetzung des Ausgangspuffers (A) einer wässrigen Lösung von Ameisensäure (pH = 3) + 2 ml einer gesättigten Lösung von Ammoniumacetat, Elutionspuffer (B) - 100%. Acetonitril. Der Volumenstrom des Eluenten beträgt 0,5 ml / min, das Volumen der injizierten Probe beträgt -25 µl. Ionen wurden im Überwachungsmodus von positiv geladenen Ionen (SRM) mit einer Masse von 300 (aufgrund der Zugabe von NrH4-Ion zum Artemisinin-Molekül) aufgezeichnet, Fensterbreite (299301) m / z. Die Ergebnisse wurden durch Tandem-Massenspektrometrie bestätigt: Aus dem Mutterion (MS) mit einer Masse von 300 m / z wurde ein Tochterion (MS2) mit einer Masse von 223 m / z erhalten.

Das Zusammentreffen von Retentionszeiten und Massenspektren von Artemisinin, bestimmt im Gras eines Einjährigen unter Verwendung der CO-Lösung der angegebenen Verbindung, lässt den Schluss zu, dass die reine Verbindung mit reinem Artemisinin identisch ist (11, 12).

Abb. 11. Chromatogramm von CO Artemisinin und P. Jährlicher Extrakt.

iv ix язтжяауат ассс »

Fig.12. Massenspektren von a) Artemisinin in n. Einjährigem Gras, b) Artemisinin CO.

Für die Chromatographie-Massenspektrometrie wurde ein absolutes Kalibrierungsverfahren zur quantitativen Analyse verwendet. Zur Bestimmung des Koeffizienten der Kalibrierungskurve wurden mehrere (mindestens 20) Kalibrierungslösungen von Artemisisinin hergestellt. Die Herstellung der Lösungen wurde wie folgt durchgeführt: 5 * 10 "3 g Artemisinin wurden abgewogen, in einen 50-ml-Messkolben gegeben und 25 ml Acetonitril wurden zugegeben. Der Inhalt des Kolbens

gründlich bis zur vollständigen Auflösung gemischt, wonach das Volumen im Kolben mit destilliertem Wasser zur Marke gebracht wurde. Durchgeführte Analyse bei unterschiedlichem Volumen der injizierten Probe von 1 bis 40 μl. Die Peakfläche in den Chromatogrammen wurde gemessen. Gemäß den erhaltenen Daten wurde eine Kalibrierungskurve erstellt (13). Die Peakflächenwerte wurden auf der Ordinatenachse und die entsprechenden Werte des Artemisiningehalts (g) auf der Abszissenachse aufgetragen.

Aus den erhaltenen Daten wurde der Koeffizient der Kalibrierungskurve berechnet: к = Б / х, wobei к der Koeffizient der Kalibrierungskurve ist, 5 die Peakfläche der analysierten Lösung ist, ï der Gehalt an Artemisinin (g)

Der Koeffizient der Kalibrierungskurve (k) ist definiert als das arithmetische Mittel der Koeffizienten k,.

Abb. 13. Graduiertabelle zur Bestimmung des Artemisinin-Inhalts.

Der Artemisiningehalt im einjährigen Wermut-Extrakt wurde durch die Formel bestimmt: C = 5 / c, wobei 5 die Peakfläche von Artemisinin in der analysierten Lösung ist und k der Koeffizient der Kalibrierungskurve ist. Metrologische Daten zur Bestimmung des Koeffizienten der Kalibrierungskurve (k) sind in Tabelle 7 angegeben.

Metrologische Merkmale der Berechnung des Koeffizienten der Kalibrierkurve Artemisinin

1 X Э2 Э Р ЮУ) ДхЕ,%

19 1.32 * 10m 1.84 * 15 4.25 * 10 95 2.09 1.28 * 10 1.97 1.90 * 10

Die Ergebnisse der quantitativen Bestimmung von Artemisinin im Wermut-Jahresextrakt sind in Tabelle 8 dargestellt.

Die Ergebnisse der quantitativen Bestimmung von Artemisinin im einjährigen Wermutextrakt-Verfahren HPLC-MS

Metrologische Merkmale (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "0,27 * 10 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10"

Die entwickelte Methode bestimmte den quantitativen Gehalt von Artemisinin im Gras n. Einjähriger in der Blütephase (Tabelle 9). Die Technik ist validiert - Spezifität, Präzision bestätigt.

Der Gehalt an Artemisinin im Graswermut jährlich

Artemisinin-Gebiet und Erfassungsdatum (%)

Ivolginsky Bezirk, 10 km von Sotnikovo, 08/12/2010 0,054 ± 0,003

Ivolginhiy rn, 10 km von Sotnikovo, 22.08.2011 0.027 ^.001

Bezirk Ivolginsky, okr. c. Oriole, 19.08.2011 0,069 ± 0,004

Kabansky Bezirk, OKR. c. Tarakanovka, 22.08.2011 0,023 ± 0,001

In Proben, die im Gebiet Ivolginsky in der Nähe von Der Oriole enthält die höchste Menge an Artemisinin (0,069%), die kleinste - in Proben aus dem Bezirk Kabansky, OKR. c. Schabe (0,023%). Es wurde festgestellt, dass die größte Menge an Artemisinin-Pflanzen in der Blütephase - 0,039%, die kleinste - in der Vegetations- und Knospenphase von 0,006 bis 0,007%. Artemisinin-Infloreszenzen enthalten - 0,029%, etwas weniger - 0,021% in den Blättern, und die minimale Menge in den Stielen beträgt 0,007% (Tabelle 10).

Der Gehalt an Artemisinin im Gras des Wermutholzes ist je nach Vegetationsphase in verschiedenen Teilen der Pflanze einjährig

Entwicklungsphase der Anlage

Vegetation knospende blühende Blätter Blütenstand Stiele

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Daher ist die optimale Zeit zum Sammeln von Gras des jährlichen Wermutholzes die Blütephase, und es ist ratsam, das gesamte Antennenteil zu sammeln.

Alle erzielten Ergebnisse fließen in die FS-Projekte auf dem Gras von Sivers-Wermut und dem Kraut des jährlichen Wermuts ein.

1. Die wichtigsten diagnostischen Merkmale des Grases von Sivers und P. Einjahresgras wurden aufgezeigt und die für die Standardisierung der Rohstoffe erforderlichen numerischen Indikatoren entwickelt. Die Reserven von Sivers und P., die in verschiedenen Gebieten der Republik Burjatien wachsen, werden identifiziert.

2. Der Gehalt an Flavonoiden, Fettsäuren, Makro- und Mikronährstoffen im Gras von Sivers n und im Gras von n. Ein Jahr wurde festgestellt. Flavonoide - Luteolin-7-glucosid, Rutin, Quercetin und Chryoeriol wurden in diesen Pflanzen mit der HPLC-MS-Methode nachgewiesen. Die Hauptfettsäuren in den untersuchten Wermutarten sind Palmitinsäure, Linolsäure, Linolensäure, 10% Octadekensäure findet sich auch in bedeutendem Wermut.

3. Es wurde festgestellt, dass die qualitative Zusammensetzung pflanzlicher ätherischer Öle unabhängig vom Wachstumsort und der Entwicklungsphase konstant bleibt. Die konstanten Komponenten von Sivers sind 1,8-Cyneol, Terpineol-4, D-Germacren, p-Farnesen, Selina-4,11-dien, Neyl-2-methylbutanoat und Chamazulen und Artemisia Keton, Karyofillen, Germacrene, ein Jahr alt D, p-Selen, karyophiles Oxid. Die Ansammlung ätherischer Öle in der Blütephase ist größer (0,7%) als in der Sprossphase (0,3%). Die größte Menge an Chamazulen p. Sivers reichert sich in den Knospenphasen (bis zu 62%) und Blüte (bis zu 34%) an.

4. Die Bedingungen für die Extraktion von Artemisinin (Extraktionsmittelart, Extraktionsmethode, Extraktionszeit) aus dem jährlichen Kraut wurden bestimmt, und es wurde festgestellt, dass die maximale Extraktion von Artemisinin durch Ultraschall- und präkrigikale CO2-Extraktion erreicht wird. Eine Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin wurde in einer einjährigen HPLC-MS-Methode entwickelt und validiert (relativer Bestimmungsfehler von ± 1,21%). Es wurde festgestellt, dass sich die größte Menge an Artemisinin im Gras eines einjährigen Kraut während der Blütephase in Blütenständen ansammelt (0,039%).

5. Entwickelte Regulierungsdokumente für Rohstoffe - das Projekt von FS „Grass of Sivers Wermut“ und das FS-Projekt von „Grass of Wermwood one year“.

Liste der zum Thema der Dissertation veröffentlichten Arbeiten

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Die chemische Zusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia gmelinii Web. et Stechm, gebürtig aus Zentralasien / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva und Plant Chemistry.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Chemische Zusammensetzung des ätherischen Öls von Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd., In Burjatien / S. V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin der Buryat State University. Ser. Chemie-Physik. - 2009. -mit. 3. - S. 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Zusammensetzung des ätherischen Öls von Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd., In Burjatien und im Irkutsker Gebiet / S. V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin des Ostsibirischen Wissenschaftszentrums der Sibirischen Abteilung der Russischen Akademie der Medizinischen Wissenschaften. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. Die Zusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia sieversiana Willd. in verschiedenen Phasen der Anlagenentwicklung / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Bulletin des Ostsibirischen Wissenschaftszentrums der Sibirischen Abteilung der Russischen Akademie der Medizinischen Wissenschaften. - 2011. - №1 (77). Teil 2. - S. 138-141.

5. Soktoeva, TE Die Komponentenzusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia glauca Pall, von Willd. Flora der Mongolei / T.E. Soktoeva, S. V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bulletin junger Wissenschaftler. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - S. 27-30.

6. Soktoeva, TE Die chemische Zusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: Materialien des XVI. Intern. conf. Studenten, Doktoranden und junge Wissenschaftler. - Moskau, 2009. - S. 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Ätherisches Wermutöl Gmelin flora Burjatien und Mongolei / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Neue Erfolge in der Chemie und in der chemischen Technologie pflanzlicher Rohstoffe“: Werkstoffe von IV All-Russia. wissenschaftlich conf. - Barnaul, 2009. - S. 49-50.

8. Soktoeva, T.E. Die Zusammensetzung des ätherischen Öls von Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd., Die in der Republik Burjatien / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Technologien und Ausrüstung der chemischen, biotechnologischen und Lebensmittelindustrie“: Materialien des II Vseross. wissenschaftlich Konferenz Studenten, Doktoranden und junge Wissenschaftler. - Biysk, 2009. - S. 91-93.

9. Pavlova E.T. Chromatographische Trennung und quantitative Bestimmung der Wirkstoffkomponenten mittels HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // „Probleme der nachhaltigen Entwicklung der Region“: Materialien des 5. Schulseminars für junge Wissenschaftler aus Russland. - Ulan-Ude, 2009. - S. 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Vergleichende Analyse der chemischen Zusammensetzungen von Artemisia L. in Zentralasien / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // „Moderne Methoden der Datenanalyse“ Siebtes Wintersimposium für Chemometrie. - Sankt Petersburg, 2010. - S. 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Vergleichende Analyse der Zusammensetzung der ätherischen Öle der Polynie der Gattung Artemisia L., gewachsen in Zentralasien / TE Soktoeva // "Umweltfreundliche und ressourcenschonende Technologien und Materialien": Materialien der Region, wissenschaftlicher Nachwuchs. conf. von Intern. Teilnahme. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Ätherische Öle der Gattung Artemisia L. / C. B. polynia. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Die Entwicklung der traditionellen Medizin in Russland: Erfahrung, Forschung, Perspektiven“: materials nauchn. conf. von Intern. Teilnahme. - Ulan-Ude, 2010. - S. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. Die Zusammensetzung des ätherischen Öls der Geschwister Wermut Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Aktuelle Studien über Baikalasien“: Materialien des Intern. wissenschaftlich Conf, - Ulan-Ude, 2010. - S. 309-312.

14. Badmaeva, E.E. Die Zusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess, wächst in der Mongolei / E.E. Badmaeva,

T.E. Soktoeva // „Ökologie Russlands und angrenzender Gebiete“: Materialien der XV. Internationale. Umweltbelastung - Nowosibirsk, 2010. - S. 325.

15. Badmaeva, E.E. Die Zusammensetzung des ätherischen Öls Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Umweltfreundliche und ressourcenschonende Technologien": Materialien Vseross. Jugendkonferenz von Intern. Teilnahme. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Extraktion von Artemisinin aus Wermut jährlich Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // „Prioritäten und Merkmale der Entwicklung der Baikalregion“: Materialien der V-ten Internationale. wissenschaftlich conf. - Ulan-Ude, 2011. - S. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Die chemische Zusammensetzung von Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // „Vegetation der Baikalregion und angrenzender Gebiete“: Materialien von Vseross. wissenschaftlich conf. - Ulan-Ude, 2011. - S. 152-153.

AAS Atomabsorptionsspektrophotometrie

A.S. absolut trockene Rohstoffe

BAS biologisch aktive Substanzen

GZ biologische Reserven

BH-Papierchromatographie

WHO Weltgesundheitsorganisation

HPLC-MS-Hochleistungs-Flüssigkeitsmassenchromatographie

GF State Pharmacopoeia

ISC-Methode der Hauptkomponenten

CO-Standardprobe

diese Dünnschichtchromatographie

EZ Betriebsreserven

SRM Select Reaktionsüberwachung

Der Autor dankt dem Studienleiter, D.Sc., prof. LD Radnaeva sowie Doktorand, Senior Researcher Baikal-Institut für Naturmanagement der Sibirischen Abteilung der Russischen Akademie der Wissenschaften Zhigzhitzhapova C.B., Doktor der Chemie, Honorarprofessor Tomsker Staatliche Universität Ryzhova G.L. um Hilfe und Unterstützung bei der Vorbereitung der Arbeit.

Es wurde in der Druckschrift 21.11.2011 signiert. Format 60x84 1/16. Offsetpapier. Band 1,5pech. l Auflage 100. Bestellnummer 67.

Gedruckt in der Druckerei des BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, Ul. Sakhyanova, 6.

Inhaltsverzeichnis der These von Soktoev, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Kapitel 1. LITERATURÜBERSICHT

Stand der Forschung zum Studium der Gattung Artemisia L.

1.1. Botanische Merkmale von Sivers Wermut und 12. Wermut

1.2. Ätherische Öle und natürliche Azulenpflanzen der Gattung Wormwood

1.2.1. Die chemische Zusammensetzung von ätherischen Ölen und natürlichem Azulen 14 Pflanzen der Gattung Wormwood

1.2.2. Verwendung ätherischer Öle von Pflanzen der Gattung Wormwood in der Medizin

1.2. Artemisinin: Entdeckung, Struktur und Synthese, physikochemische Eigenschaften, Mechanismus der Antiplasmodium-Wirkung

1.3. Fettsäurezusammensetzung von Pflanzen der Gattung Wormwood

1.4. Phenolische Verbindungen von Pflanzen der Gattung Wormwood

1,5. Die elementare Zusammensetzung von Pflanzen der Gattung Wormwood 38 SCHLUSSFOLGERUNGEN ZUM KAPITEL

KAPITEL 2. MERKMALE VON OBJEKTEN UND METHODEN 41 FORSCHUNG

2.1. Untersuchungsobjekte, Rohstoffproben - Gras von Sivers-Wermut und 41 Kräuter von Wermut jährlich

2.2. Forschungsmethoden

2.2.1. Biologische Forschungsmethoden

2.2.1.1. Anatomische und diagnostische Studie

2.2.1.2. Ressourcenforschung

2.2.2. Methoden zur qualitativen und quantitativen Bestimmung von 43 biologisch aktiven Substanzen

2.2.3. Merchandising-Analyse: Methoden zur Ermittlung von 50 Rohstoffen guter Qualität

2.2.4. Methoden der statistischen Verarbeitung. Die Hauptkomponentenmethode.

KAPITEL 3. PHARMAKOGNOSTISCHE ANALYSE VON HERBALIS 53 CIVERS

3.1. Mikroskopische Analyse von Gras von Sivers Wermut

3.2. Sibers Wormwood Stocks

3.3. Das Studium der wichtigsten BAS Grasgeschwister Wermut

3.3.1. Qualitativer und quantitativer Gehalt der Bestandteile 64 ätherisches Öl von Sivers Wermut

3.3.1.1. Die chemische Zusammensetzung und Dynamik der Akkumulation von ätherischem Öl und 64 Hamazulena im Gras von Sivers Wermut in verschiedenen Gebieten Burjatiens

3.3.1.2. Besonderheiten der Ansammlung von ätherischem Öl und Chamazulen im Gras von 65 Sivers-Wermut in verschiedenen Phasen der Pflanzenentwicklung

3.3.1.3. Die Ansammlung von kleineren Bestandteilen des ätherischen Öls des Grases 71 Sivers Wermut

3.3.1.4. Merkmale der Ansammlung von ätherischem Öl und Chamazulen im Gras 72 Sivers-Wermut aus verschiedenen Teilen der Pflanze

3.3.2. Der qualitative und quantitative Gehalt von Flavonoiden und Tanninen im Gras von Sivers Wermut

3.3.3. Fettsäurezusammensetzung des Grases von Sivers-Wermut

3.3.4. Elementare Zusammensetzung des Kräuterwermuts Jährliche SCHLUSSFOLGERUNGEN DES KAPITELS

KAPITEL 4. PHARMAKOGNOSTISCHE ANALYSE VON KRÄUTEREN KRÄUTERN 83 EINJAHREN

4.1. Mikroskopische Analyse des Kräuterwermuts jährlich

4.2. Wermutvorräte jährlich

4.3. Die Studie des wichtigsten BAS-Graswermuts jährlich

4.3.1. Der qualitative und quantitative Gehalt der Bestandteile des ätherischen Öls im Kräuterwermut wird jährlich festgelegt

4.3.1.1. Die chemische Zusammensetzung und Dynamik der Ansammlung ätherischer Öle in 92 Gras von einjährigem Wermut aus verschiedenen Wachstumsorten

4.3.1.2. Besonderheiten der Anreicherung ätherischer Öle im Wermutgras jährlich in verschiedenen Entwicklungsstadien und in verschiedenen Teilen der Pflanze

4.3.2. Qualitative und quantitative Bestimmung von Flavonoiden Gras 100 Wermut jährlich

4.3.3. Fettsäurezusammensetzung des Kräuterwermuts einjährig ^ ® *

4.3.4. Die elementare Zusammensetzung des Kräuterwermuts jährlich

4.4. Entwicklung einer Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin im Wermutgras von 103 Wiesen durch jährliche HPLC-MS-Methode

4.4.1. Auswahl der Bedingungen für die quantitative Extraktion von Artemisinin aus 103 einjährigen Wermut

4.4.2. Entwicklung einer Technik zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin 104 mittels HPLC-MS

4.4.3. Quantitativer Gehalt an Artemisinin im jährlichen Wermut von verschiedenen Wachstumsorten

4.4.4. Analyse des quantitativen Gehalts an Artemisinin im Gras 107 Wermut jährlich nach verschiedenen Entwicklungsphasen und in verschiedenen Anlagenteilen

KAPITEL 5. EINSTELLEN DER INDIKATOREN 111 WARTE VON ROHMATERIALIEN

5.1. Morphometrische Indikatoren für Rohstoffe

5.2. Standardisierung von Grasgeschwister-Wermut

5.2.1. Merchandising-Indikatoren Gras Sills Wermut!

5.2.2. Standardisierung von Sivers Wermutkraut nach dem Gehalt von 115 Hamazulelen in der Zusammensetzung ätherisches Öl

5.2.3. Festlegung der Haltbarkeit von Sivers Wermutgras

5.3 Standardisierung des Kräuterwermuts jährlich

5.3.1. Rohstoffindikatoren Gras Sagebrush alljährlich * '^

5.3.2. Jährliche Standardisierung des Kräuterwermuts nach Artemisiningehalt

5.3.3. Festlegung der Haltbarkeit des Kräuterwermuts jährlich

Einführung der Arbeit zum Thema "Pharmazeutische Chemie, Pharmakognosie", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, Zusammenfassung

Relevanz des Themas. Pflanzen der Gattung Artemisia (Wermut) sind vielversprechende Quellen für biologisch aktive Substanzen, wie der Estragon-Wermut Artemisia dracunculus L., der Wermut Artemisia absinthium L., der Wermut Artemisia vulgaris L. wird häufig in der Volksmedizin, der traditionellen Medizin und der Lebensmittelindustrie verwendet. Artemisia annua L., ein jährlicher Wermut, wurde in vielen Ländern erfolgreich in die Kultur eingeführt und wurde 2001 von der WHO als Hauptquelle für Artemisinin, die Erstlinientherapie bei Malaria, empfohlen. Heute stellen Länder, die Artemisinin herstellen, etwa ein Viertel des weltweiten Gesundheitsbedarfs bereit [1, 2]. Aus dem Einjährigen wurden 137 biologisch aktive Verbindungen isoliert, darunter 40 Sesquiterpene, 10 Triterpene, 7 Cumarine und 46 Flavonoide, die als Grundlage für die Wirkstoffentwicklung dienen können [3]. In den 80er Jahren des 20. Jahrhunderts versuchte eine Gruppe von Wissenschaftlern [4], den wildwachsenden Teil der einjährigen Flora der UdSSR im ULI (Moskau) zu kultivieren. Heutzutage werden an der Tomsk State University wichtige Arbeiten zur Einführung des ersten Jahres durchgeführt. In Burjatien n. Einjährig ist eine wild wachsende Art.

Neben dem Einjährigen in Burjatien ist Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd. Weit verbreitet, was auch eine vielversprechende Art ist. Im Gras von P. Sievers enthalten Flavonoide, ätherisches Öl, Cumarine [5-8]. Das ätherische Öl von Seabera ist als Quelle für Chamazulene von Interesse, eine nicht toxische Verbindung mit entzündungshemmenden, bakteriziden, regenerativen Wirkungen [9, 10].

Bislang wurde eine detaillierte chemische Untersuchung von Sivers-Wermut und Wermut der jährlichen Flora Burjatiens nicht als vielversprechende Quelle biologisch aktiver Substanzen durchgeführt. Daher ist ihre Untersuchung eine dringende Aufgabe.

Ziel: Pharmakognostische Studie von Sivers Wermut Artemisia sieversiana Willd. und Wermut einjährig Artemisia annua L. als wertvolle Quelle für biologisch aktive Substanzen.

Um dieses Ziel zu erreichen, müssen folgende Aufgaben gelöst werden:

1. Ermitteln Sie die anatomischen und diagnostischen Merkmale des oberirdischen Teils von Sivers S. und S. Ein Jahr, legen Sie Rohstoffindikatoren für Rohstoffe fest, bewerten Sie die Reserven und die Erntemöglichkeiten S. Ein Jahr und Sivers auf dem Gebiet der Republik Burjatien;

2. Um die chemische Zusammensetzung der Hauptgruppen der biologisch aktiven Substanzen dieser Pflanzen zu untersuchen und deren quantitativen Gehalt zu bestimmen, legen Sie die Lokalisierung von ätherischen Ölen und Artemisinin in einzelnen Pflanzenteilen fest, untersuchen Sie die Dynamik ihrer Anhäufung in den Entwicklungsphasen und bestimmen Sie die optimalen Sammelbedingungen.

3. Entwicklung einer Methode zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin im oberirdischen Teil des Einjährigen;

4. Festlegung der Qualitätsindikatoren und -normen für den Gehalt an biologisch aktiven Grundstoffen; Erarbeitung einer Dokumentation der Vorschriften für medizinische Rohstoffe - das Gras von Sivers-Wermut und das Gras von jährlichem Wermut.

Wissenschaftliche Neuheit. Die wichtigsten diagnostischen Merkmale des Rasens von Sivers und P. annual wurden festgelegt, die für die Standardisierung der Rohstoffe erforderlichen numerischen Indikatoren wurden entwickelt.

Es wurde eine Studie über die chemische Zusammensetzung des Rasens von Sivers und über das Gras eines Einjährigen durchgeführt. Der Gehalt an ätherischen Ölen, Flavonoiden, Fettsäuren, Makro- und Mikroelementen wurde bestimmt. Flavonoide - Luteolin-7-glucosid, Rutin, Quercetin und Chryoeriol wurden in diesen Pflanzen mit der HPLC-MS-Methode nachgewiesen. Die Hauptfettsäuren in den untersuchten Wermutarten sind Palmitinsäure, Linolsäure, Linolensäure, 10% Octadekensäure findet sich auch in bedeutendem Wermut.

Die Bedingungen für die Extraktion von Artemisinin (Extraktionsmittelart, Extraktionsmethode, Extraktionszeit) aus dem jährlichen Kraut wurden bestimmt und es wurde festgestellt, dass die maximale Extraktion von Artemisinin durch Ultraschall- und subkritische CO2-Extraktion erreicht wird. Durch HPLC-MS wurde festgestellt, dass die größte Menge an Artemisinin im einjährigen Alter während der Blütephase in den Infloreszenzen enthalten ist.

Untersuchte die Dynamik der Ansammlung ätherischer Öle je nach Entwicklungsphase und Anlagenteil. Die größte Menge an ätherischem Chamazulenöl pp. Siversa reichert sich in den Knospenphasen und Blütenständen in Blütenständen an.

Die festgelegten Qualitätsindikatoren von BAS sind in den Regulierungsdokumenten enthalten.

Praktische Bedeutung Die Reserven und das mögliche jährliche Volumen der Beschaffung einer Siedlung von Sivers und einer einjährigen Ansiedlung auf dem Territorium der Republik Burjatien (Siedlung Sivers - von 0,1 bis 73,7 Tonnen pro Jahr und einer Siedlung von einem Jahr - von 1,2 bis 122,3 Tonnen pro Jahr).

Es wurde ein Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin in S. Grass durch eine jährliche HPLC-MS-Methode entwickelt. Die Bedingungen für die Probenvorbereitung von Rohstoffen zur Analyse zur quantitativen Bestimmung von Artemisinin sind wissenschaftlich begründet.

Die Standardisierung der Rohstoffe wurde durchgeführt, FS-Projekte wurden entwickelt - "Sivers Wormwood Herbal" und "Wormwood One Year Grass".

Der Umsetzungsgrad Die Methode zur Gewinnung von ätherischen Ölen und mikroskopische Analysedaten wurden getestet und in den Bildungsprozess der Abteilung für Pharmazie der staatlichen bundesstaatlichen Bildungseinrichtung „Buryat State University“ (Implementierungsgesetz Nr. 1 vom 6. September 2011) eingeführt. Projekte von FS auf Gras von Sivers Wermut und einjähriges Wermut werden zur Prüfung vorbereitet.

Approbation der Arbeit. Die wichtigsten Bestimmungen der Dissertation wurden vorgestellt und diskutiert auf: einer wissenschaftlich-praktischen Konferenz mit internationaler Beteiligung „Die Entwicklung der traditionellen Medizin in Russland: Erfahrung, Forschung, Perspektiven“ (Ulan-Ude, 2010); 7. Wintersimposium für Chemometrie "Moderne Methoden der Datenanalyse" (Sankt-Petersburg, 2010); die internationale wissenschaftliche Konferenz, die dem 15-jährigen Bestehen der Buryat State University "Aktuelle Studien des Baikalasiens" gewidmet ist (Ulan-Ude, 2010); V internationale wissenschaftlich-praktische Konferenz "Prioritäten und Merkmale der Entwicklung der Baikalregion" (Ulan-Ude, 2011); X internationale wissenschaftlich-praktische Konferenz "Probleme der Botanik in Südsibirien und der Mongolei" (Barnaul, 2011); IV. Allrussische Konferenz "Neue Fortschritte in der Chemie und in der chemischen Technologie von Pflanzenmaterialien" (Barnaul, 2009); XVI. Internationale Konferenz der Studenten, Doktoranden und Nachwuchswissenschaftler "Lomonosov-2009" (Moskau, 2009); XV. Internationale ökologische Studentenkonferenz "Ökologie Russlands und angrenzender Gebiete" (Novosibirsk, 2010); II. Allrussisch-wissenschaftlich-praktische Konferenz von Studenten, Doktoranden und jungen Wissenschaftlern "Technologien und Ausrüstung der chemischen, biotechnologischen und Lebensmittelindustrie" (Biysk, 2009); Allrussisch-wissenschaftlich-praktische Konferenz "Die Vegetation des Baikalgebiets und angrenzender Gebiete" (Ulan-Ude, 2011); V Schulseminar für junge Wissenschaftler aus Russland “Probleme der nachhaltigen Entwicklung der Region” (Ulan-Ude, 2009); die regionale wissenschaftlich-praktische Jugendkonferenz mit internationaler Beteiligung "Umweltfreundliche und ressourcenschonende Technologien und Materialien" (Ulan-Ude, 2010).

Die Arbeit wurde im Rahmen von Forschungsprojekten durchgeführt: RFBR: Nr. 08-04-90202-Monga „Untersuchung der biogenetischen Muster der Biosynthese biologisch aktiver Verbindungen von endemischen Pflanzen in Zentralasien“ (2008–2009), Nr. 08-04-9803 7-rsibirya und

Die chemische Zusammensetzung von Pflanzen als Indikator für den Zustand der Ökosysteme der Baikalregion "(2008-2010); interdisziplinäres Integrationsprojekt №93 "Entwicklung der Forschung auf dem Gebiet der medizinischen Chemie und Pharmakologie als wissenschaftliche Grundlage für die Entwicklung heimischer Arzneimittel"; ein gemeinsames Projekt mit der Akademie der Wissenschaften der Mongolei "Neue lipo- und nanosomale Formen von Medikamenten unter Verwendung natürlicher Rohstoffe"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros „Mobilität junger Wissenschaftler“ (2010), №11-03-90705-mobst wissenschaftliche Arbeit (Ausbildung) von russischen Nachwuchswissenschaftlern in führenden wissenschaftlichen Organisationen der Russischen Föderation 2011 (2011).

Veröffentlichungen. Den Ergebnissen zufolge wurden 17 wissenschaftliche Arbeiten veröffentlicht, von denen drei in von der Higher Attestation Commission des Verteidigungsministeriums der Russischen Föderation empfohlenen Zeitschriften veröffentlicht wurden.

Zur Verteidigung werden herausgenommen:

• die Ergebnisse der Untersuchung der anatomischen Struktur, der Bestände und der Echtheitskriterien von Sivers und P., die in Burjatien wachsen;

• Ergebnisse einer chemischen Untersuchung biologisch aktiver Substanzen und ihrer saisonalen Akkumulationsdynamik;

• Ergebnisse von Studien zur Standardisierung des oberirdischen Teils von Sivers S. Und S. Ein Jahr.